第214期：1~21日龄肉鸡肾脏单胺氧化酶活性测定日粮铜需要量
论文ID
原名：Determination of dietary copper requirement by the monoamine oxidase activity in kidney of broilers from 1 to 21 days of age
译名：1~21日龄肉鸡肾脏单胺氧化酶活性测定日粮铜需要量
作者：Yun Hu a, 1, Zhiyong Chen b, 1, Lin Lu b, Liyang Zhang b, Tao Liu c, Xugang Luo a, *, Xiudong Liao b, *
完成单位：
a Poultry Mineral Nutrition Laboratory, College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou, 225000, China
b Mineral Nutrition Research Division, State Key Laboratory of Animal Nutrition, Institute of Animal Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing, 100193, China
c Biochemistry Department, Case Western Reserve University, Cleveland, 44106, USA
期刊：Animal Nutrition
影响因子：6.383
发表时间：2021-11-05
1、摘要
目前肉仔鸡日粮铜（Cu）需要量（8 mg/kg）主要基于生长、血红蛋白浓度或红细胞比容，这些指标可能不是评价肉仔鸡日粮铜需要量的最敏感指标。本研究旨在利用生物化学或分子生物标记物来估计1-21日龄饲喂传统玉米-豆粕型日粮的肉仔鸡的日粮铜需要量。选用1日龄Arbor Acres公鸡384只，随机分为6个处理组，每个处理8个重复，分别饲喂含铜5.17 mg/kg的玉米-豆粕基础日粮，基础日粮中添加3、6、9、12或15 mg/kg的CuSO4·5H2O，连续饲喂21d，用折线模型进行回归分析，确定适宜的日粮铜水平。
日粮铜水平影响血清铜含量和肝、肾单胺氧化酶（MAO）活性（P<0.05），但对肉仔鸡的生长性能、心脏、肾脏、胰腺和脾脏中的铜含量，血清中含铜和锌的超氧化物歧化酶（CuZnSOD）活性和铜蓝蛋白含量，肉鸡上述组织中的铜蓝蛋白、CuZnSOD、MAO A、MAO B、COX 4I1和COX 1 mRNA和蛋白的表达无显著影响（P>0.05）。随日粮铜水平的提高，血清和肝脏铜含量呈直线增加（P<0.05），肾脏MAO活性呈线性和二次曲线下降（P<0.05）。根据拟合的肾脏MAO活性折线模型（P=0.035）估算的日粮铜需要量为11.30 mg/kg。综上所述，肾脏MAO活性是评价肉鸡日粮铜需要量的一项新的敏感指标，1~21日龄饲喂常规玉米-豆粕日粮的肉鸡日粮铜需要量为11.30 mg/kg，高于国家研究委员会（NRC）现行的肉鸡铜需要量（8 mg/kg）。
2、试验设计
3、结果与分析
表1：1至21日龄肉鸡基础日粮的成分和营养水平（%，饲喂基础）。
表2：分析了1 ~ 21日龄肉仔鸡日粮中铜的含量
表3：实时PCR扩增引物序列
3.1 生长性能
表4：日粮添加铜水平对1 ~ 21日龄肉仔鸡生长性能和死亡率的影响
日粮中添加铜水平对肉鸡1 ~ 21 d的平均日增重、平均日采食量、料重比和死亡率无显著影响（P > 0.05）（表4）。
3.2 铜的含量
表5：日粮添加铜水平对21日龄肉仔鸡血清和组织铜含量的影响
日粮中添加铜水平显著影响血清和肝脏铜浓度（P < 0.05），并随日粮添加铜水平的升高呈线性升高（P < 0.05）（表5），而心脏、肾脏、胰腺和脾脏铜浓度未受日粮添加铜水平的影响（P > 0.05）。血清和肝脏铜浓度的二次响应不显著（P > 0.05）。因此，上述指标均不适合用于评价肉仔鸡日粮铜的需要量。
3.3 酶活性和铜蓝蛋白含量
表6：日粮添加铜水平对21日龄肉仔鸡血清CuZnSOD活性和铜蓝蛋白含量的影响
表7：日粮添加铜水平对21日龄肉仔鸡组织中含铜酶活性的影响
日粮中添加铜水平不影响血清中CuZnSOD活性和铜蓝蛋白含量（P>0.05）（表6）。添加铜水平影响肾脏的MAO活性（P<0.05），但对心脏、肝脏、胰腺和脾脏的MAO活性没有影响（P>0.05）（表7）。随着日粮添加铜水平的增加，肾脏中的MAO活性呈线性和二次方下降（P<0.05）。随着日粮添加铜水平的增加，心脏、肝脏、肾脏、胰腺和脾脏中的CuZnSOD活性以及心脏和肝脏中的COX活性没有显著变化（P>0.05）（表7）。基于这些结果，肾脏中的MAO活性是敏感的，适合于评估肉鸡的日粮铜需求量。
表8：日粮添加铜水平对21日龄肉仔鸡组织中含铜酶mRNA表达的影响
表9：日粮添加铜水平对21日龄肉仔鸡组织中含铜酶蛋白表达的影响
图1所示：21日龄肉仔鸡心脏（A）、肾脏（B）、肝脏（C）、胰腺（D）和脾脏（E）含铜酶的代表性蛋白印迹。CuZnSOD：含铜锌超氧化物歧化酶；COX 4I1：细胞色素c氧化酶亚基4I1；COX 1：细胞色素c氧化酶1。
日粮添加铜水平不影响心脏、肝脏、肾脏、胰腺和脾脏中CuZnSOD、MAO A和MAO B mRNA的表达，心脏、肝脏和肾脏中COX 4I1和COX 1 mRNA的表达以及肝脏中铜蓝蛋白mRNA的表达（表8）（P>0.05）。与mRNA表达一致，心脏、肝脏和肾脏中CuZnSOD、MAO A、COX 4I1和COX 1蛋白的表达以及肝脏中铜蓝蛋白的表达，以及胰腺和脾脏中CuZn超氧化物歧化酶蛋白的表达也不受日粮添加铜水平的影响（P>0.05）（表9和图1）。因此，所有这些指标都不是评估肉鸡日粮铜需求量的敏感生物标志物。
3.4 肉鸡日粮铜需求量的估算
表10：根据分析的日粮铜含量，基于肾脏MAO活性的折线模型估算日粮铜需求量
通过回归分析的折线模型估计的肉鸡日粮铜需求量结果如表10所示。根据肾脏MAO活性的折线模型（P=0.035）和分析的日粮铜含量，对于1至21日龄饲喂常规玉米豆粕日粮的肉鸡，日粮铜的最佳需求量估计为11.30 mg/kg。
4 结论
本研究的结果表明，肾脏中的MAO活性是估算肉鸡日粮铜需求量的一个新的敏感标准，根据该参数的折线模型可知，从1日龄到21日龄饲喂常规玉米豆粕日粮的肉鸡铜需要量为11.30 mg/kg，高于当前NRC需求量（8 mg/kg）。
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