第199期:纳米硒对六价铬诱导的鸡肝脏脂肪酸代谢异常的影响
论文ID
原名:Effect of selenium nanoparticles against abnormal fatty acid metabolism induced by hexavalent chromium in chicken’s liver
译名:纳米硒对六价铬诱导的鸡肝脏脂肪酸代谢异常的影响
作者:Min Luo1, Shucheng Huang2, Jialu Zhang1, Lihong Zhang1, Khalid Mehmood1,3,Jinhuan Jiang1,Niya Zhang1,Donghai Zhou1
完成单位:
1 College of V eterinary Medicine, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, People’s Republic of China
2 College of Animal Science and V eterinary Medicine, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002
3 University College of V eterinary and Animal Sciences, Islamia University of Bahawalpur, Bahawalpur, Punjab 63100, Pakistan
期刊:Environmental Science and Pollution Research
影响因子:3.056
发表时间:2019-05-06
1、摘要
硒是脂肪酸代谢通路中的一个重要位点,其对肝脏中过量脂肪酸诱导的细胞凋亡和氨基酸代谢异常的影响是众所周知的。然而,纳米硒(NS)对六价铬(K2Cr2O7)引起的脂肪酸代谢异常的保护作用尚未被研究。因此,我们通过添加不同剂量的纳米硒来研究纳米硒对Cr(VI)引起的不良反应的作用。
将120只1日龄雏鸡随机分为6个组,分别为对照组、Cr(VI)暴露组、保护组、处理组、预防组和纳米硒对照组。RT-qPCR结果显示,在试验第35天,添加NS极显著下调鸡肝脏脂肪酸合成酶(FASN)mRNA表达水平(P < 0.01),而极显著上调肝脏酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1)mRNA表达水平(P < 0.01)。Western blot分析进一步验证了相似的结果。此外,在免疫组化分析中,NS添加组分别显著提高和降低了ACOX1和FASN抗体表达水平。综上所述,纳米硒可以缓解K2Cr2O7诱导的鸡肝脏脂肪酸代谢异常。
2、试验设计
3、结果与分析
表1:用于q-PCR反应分析的引物
3.1 脂肪酸代谢相关基因在肝脏中的表达
图1:铬(VI)导致鸡肝脏脂肪酸代谢途径相关基因的mRNA表达水平异常。
a,b:用RT-qPCR检测FASN和ACOX1基因的mRNA水平(GAPDH为对照)。数据以均数±SD表示(n=3)。
C组:为对照组(标准饲料加水);Ga组:Cr(VI)暴露组(标准饲料+K2Cr2O7);Gb组:保护组(K2Cr2O7+NS);Gc组:治疗组(K2Cr2O7处理2周,加NS);Gd组:预防组(NSe治疗2周,加K2Cr2O7);Ge:NSe对照组(标准饲料+NS)。(下图同)
RT-qPCR检测对照组、铬(VI)暴露组、纳米硒补充组中FASN和ACOX1的mRNA表达水平(图1)。与对照组相比,铬(VI)暴露引起FASN和ACOX1基因表达水平的显著差异(P<0.01)。同时,与Cr(VI)暴露组相比,我们观察到Gb、Gc和Ge中上调的基因(FASN)mRNA水平极显著下调(P<0.01)。同样,与Ga相比,Gb、Gc、Gd和Ge中ACOX1 mRNA表达量均显著上调(P<0.01)。
3.2 肝脏中脂肪酸代谢相关基因的蛋白质水平
图2:铬(VI)引起鸡肝脏脂肪酸代谢异常中脂肪酸代谢途径相关基因的蛋白表达水平。
a-c通过western印迹分析FASN和ACOX1基因的蛋白质水平(GAPDH作为对比)。数据表示为平均值±SD(n=3)。
如图2所示,与对照组相比,Cr(VI)暴露组Ga中FASN蛋白表达水平显著升高(P < 0.01)。此外,ACOX1在Ga中的蛋白表达与FASN相反。与Cr(VI)处理组相比,添加纳米硒后,上调基因(FASN)蛋白水平降低(P < 0.01) (Gc和Gd除外)。此外,与铬(VI)暴露组相比,纳米硒组(除Gd外)ACOX1蛋白水平显著升高(P<0.05)。
3.3 肝细胞的免疫组织化学检测
图3:FASN基因在C、GA、GB、GC、Gd和GE鸡肝脏中的免疫组织化学抗体表达及定位
图4:ACOX1基因在C、GA、GB、GC、Gd和GE鸡肝脏中的免疫组织化学抗体表达及定位
如图3和图4所示,成功监测到脂肪酸代谢途径相关FASN和ACOX1基因在鸡肝细胞中的抗体表达水平。与对照组相比,Ga肝细胞质中FASN基因抗体表达明显增加。此外,与Cr(VI)暴露组相比,FASN基因在Gb、Gc和Gd中的表达明显降低。FASN基因抗体表达水平在Gb、Gc和Gd之间无显著差异。FASN(Ge)抗体表达与对照组相似。但与对照组相比,Ga的ACOX1基因表达与FASN完全不同。与Cr(VI)暴露组相比,Gb组、Gc组和Gd组(Ge组除外)的ACOX1抗体表达明显增加。同时,ACOX1(Ge)抗体表达水平与对照组相似。
4 结论
因此,ACOX1的表达对于保护肝组织免受脂质过氧化至关重要。FASN mRNA表达水平的降低和ACOX1 mRNA表达水平的升高是一个值得注意的标志,纳米硒在对抗肝组织脂质过氧化、保护肝组织方面发挥着重要作用。Western blotting分析检测对照组和纳米补硒组雏鸡肝脏蛋白质表达水平,然后免疫组化检测和比较对照组、六价铬暴露组、保护组、治疗组、预防组和纳米硒对照组的抗体定位和表达。综上所述,本研究证实了纳米硒对铬(VI)对鸡肝脏的毒性的保护作用。