第175期：锰源对肉鸡小肠锰吸收及相关转运蛋白表达的影响

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原名：Effect of manganese source on manganese absorption and expression of related transporters in the small intestine of broilers

译名：锰源对肉鸡小肠锰吸收及相关转运蛋白表达的影响

作者：X. D. Liao,^∗^,1 G. Wang,^∗^,^†^,1 L. Lu,^∗ L. Y. Zhang,^∗ Y. X. Lan,^† S. F. Li,^‡ and X. G. Luo^∗^,2

完成单位：^∗Mineral Nutrition Research Division, Institute of Animal Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100193, P. R. China;
^†Department of Animal Science, Southwest University Rongchang Capmus, Chongqing 402460, P. R. China;
^‡ Department of Animal Science, Hebei Normal University of Science and Technology, Qinhuangdao 066004, P. R. China;

期刊：Poult Sci.

影响因子：2.659

发表时间：2019-10

1、摘要

本试验旨在研究不同锰源对肉仔鸡小肠锰吸收及锰、氨基酸和小肽转运蛋白表达的影响。将320只15日龄AA公鸡随机分为5个处理，每个处理8个重复，每个重复8只鸡，分别饲喂不添加锰的对照日粮、添加110 mg/kg硫酸锰的对照日粮，以及添加110 mg/Kg的3种不同螯合强度（弱（OW）、中等（OM）、强（OS）螯合强度）的有机锰螯合物的日粮，饲喂14d。第28d，添加锰组血浆锰含量显著高于对照组（P<0.03），OS组高于OM组，OM组高于OW和MnSO4组。第21和28d，添加锰的肉鸡十二指肠二价金属转运蛋白1（DMT1）和铁转运蛋白1（FPN1）mRNA水平和FPN1蛋白水平均显著高于对照组（P<0.02）。28d时OM组和OS组十二指肠DMT1 mRNA和蛋白水平显著高于OW组和MnSO₄组（P<0.05）。回肠氨基酸转运蛋白[b^0,+型氨基酸转运蛋白1（B⁰AT1）和兴奋性氨基酸转运蛋白3（EAAT3）]mRNA水平显著高于十二指肠和空肠（P<0.0005），肽转运蛋白1低于十二指肠和空肠（P<0.04），而锰源对小肠氨基酸转运蛋白和肽转运蛋白基因表达水平无显著影响（P>0.05）。
结果表明，DMT1和FPN1均能促进肉鸡十二指肠对锰的吸收，但氨基酸和肽转运体可能不参与有机锰螯合物的转运，中等、强螯合强度的有机螯合物，特别是强螯合强度的有机锰螯合物，其对锰的吸收量较高，这可能与DMT1在肉仔鸡十二指肠中的表达量增加有关。

2、试验设计

1. 结果与分析
表1：肉鸡基础饲粮组成（饲喂基础）

表2：试验饲粮中锰的含量

表3：引物序列用于RT- PCR扩增

3.1生长性能
锰源对15 ~ 21d、22 ~ 28d、15 ~ 28d肉鸡的ADFI、ADG、料重比和死亡率均无影响（P> 0.29）。
3.2 肝静脉血浆锰含量
表4：饲粮锰源对21、28日龄肉鸡肝门静脉血浆锰含量的影响

锰源对21日龄和28日龄肉鸡肝静脉血浆锰含量均有影响（P<0.0001）（表4）。21日龄和28日龄时，各Mn添加组血浆Mn含量均高于对照组（P<0.02）。21d时，OS组和OM组血浆Mn含量高于OW组和MnSO₄组（P<0.0002），但OS组和OM组之间、OW组和MnSO₄组之间的血浆Mn含量无显著差异（P> 0.07）。28d时，OS组血浆Mn含量高于OM组（P<0.03）， OM组高于OW和MnSO₄组；而OW组和MnSO₄组血浆Mn含量无显著性差异（P> 0.27）。
3.3 锰、氨基酸和肽转运蛋白的mRNA水平
表5：饲粮锰源和肠段对21日龄肉仔鸡小肠DMT1和FPN1 mRNA水平的影响

表6：饲粮锰源和肠段对28日龄肉仔鸡小肠DMT1和FPN1 mRNA水平的影响

不同锰源饲粮对肉仔鸡肠段DMT1和FPN1 mRNA水平均有影响（P<0.0001）， 21和28 d 均对肉仔鸡十二指肠和空肠DMT1 mRNA水平和十二指肠FPN1 mRNA水平有影响（P<0.008）（表5和表6）。与对照组相比，饲粮添加Mn提高了21d和28d各组十二指肠和空肠DMT1 mRNA水平（P<0.007）和十二指肠FPN1 mRNA水平（P<0.007），但除28日龄DMT1 mRNA水平外，各组间差异无统计学意义（P>0.07）。28日龄时，OS组和OM组十二指肠DMT1 mRNA水平均高于OW组和MnSO₄组（P<0.02），而OW组和OM组、OW组和MnSO₄组间差异不显著（P>0.93）。

表7：饲粮锰源和肠段对21日龄肉仔鸡小肠B⁰AT1和LAT1 mRNA水平的影响

表8：饲粮锰源和肠段对28日龄肉仔鸡小肠B⁰AT1和LAT1 mRNA水平的影响

表9：饲粮锰源和肠段对21日龄肉仔鸡小肠rBAT和y⁺LAT1 mRNA水平的影响

表10：饲粮锰源和肠段对28日龄肉仔鸡小肠rBAT和y⁺LAT1 mRNA水平的影响

表11：饲粮锰源和肠段对21日龄肉仔鸡小肠EAAT3和PePT1 mRNA水平的影响

表12：饲粮锰源和肠段对28日龄肉仔鸡小肠EAAT3和PePT1 mRNA水平的影响

肠段影响第21和28d B⁰AT1、LAT1、EAAT3和PePT1的mRNA水平以及第21d rBAT的mRNA水平（P<0.04），但对第21和28d y⁺LAT1和第28d rBAT的mRNA水平没有影响（P>0.10）（表7−12）。锰源对上述指标均无显著影响（P> 0.05）。在第21d，B⁰AT1和EAAT3 mRNA水平回肠高于十二指肠和空肠（P<0.0005），空肠高于十二指肠（P<0.05）。第21d，空肠和回肠LAT1和rBAT mRNA水平高于十二指肠（P<0.04），空肠和回肠之间差异无统计学意义（P> 0.11）。第28d，回肠B⁰AT1、LAT1和EAAT3 mRNA水平高于十二指肠和空肠（P<0.03），十二指肠和空肠间差异无统计学意义（P>0.48）。但在21 d和28 d，回肠PePT1 mRNA水平均低于十二指肠和空肠（P<0.04）。
3.4 DMT1和FPN1蛋白水平
表13：饲粮锰源对21和28日龄肉鸡小肠DMT1和FPN1蛋白表达的影响

图1：21 （A）和28 （B）日龄肉鸡小肠DMT1和FPN1的代表性免疫印迹

OW =有机锰（Mn）螯合物弱Qf（2.35±0.49）；OM =具有中等Qf（61.9±9.1）的有机Mn螯合物；OS =具有强Qf（147±23）的有机Mn螯合物；DMT1 =二价金属转运体1；FPN1 =运铁蛋白1；GADPH =甘油醛-3-磷酸脱氢酶

锰源对21d和28d肉鸡十二指肠DMT1和FPN1蛋白水平均有影响（P<0.03）;但对空肠和回肠DMT1和FPN1蛋白水平无影响（P>0.16）（表13和图1）。OS组十二指肠DMT1蛋白水平高于其他4组（P<0.03）， 21 d时其余4组十二指肠无差异（P>0.41）。28d肉仔鸡十二指肠DMT1蛋白水平OS组和OM组均高于对照组、MnSO4组和OW组（P<0.05），3组间差异不显著（P>0.10）。与对照组相比，补锰显著提高了肉鸡十二指肠中FPN1蛋白水平(P<0.02)，但在21日龄和28日龄各补锰组肉鸡十二指肠中FPN1蛋白水平差异不显著(P>0.08)。

4. 结论
综上所述，DMT1和FPN1均能促进Mn的吸收，但氨基酸和肽转运体可能不参与有机Mn在肉仔鸡小肠内的转运。螯合强度适中和较强的有机锰螯合物，特别是螯合强度较强的有机锰螯合物，其对锰的吸收量较高，这可能与DMT1在肉仔鸡十二指肠中的表达量增加有关。

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