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第100期:日粮添加1%或3%的天然菊苣菊粉对生长猪的大肠黏膜蛋白质组的影响

论文ID

原名:Effect of dietary inclusion of 1% or 3% of native chicory inulin on the large intestinal mucosa proteome of growing pigs

译名:日粮添加1%或3%的天然菊苣菊粉对生长猪的大肠黏膜蛋白质组的影响

期刊:animal

影响因子:2.026

发表时间:2020-03-13

doi:10.1017/S1751731120000440
 
1. 摘要
菊苣菊粉已被证明是幼龄动物日粮中抗生素生长促进剂最有前途的替代品之一。当前,人们已经提出了几种益生元作用的潜在机制,例如改变肠道菌群组成,从而改善宿主上皮完整性和肠粘膜免疫力。本文旨在研究菊粉对猪大肠蛋白质组的作用及其对肠屏障功能的影响。试验主要通过利用蛋白质组学技术来探究生长猪日粮中添加天然菊苣菊粉40天后大肠粘膜蛋白质组的变化。选取24头10日龄仔猪均分成3组,分别饲喂不含谷物的基础日粮或富含菊粉(浓度1%或3%,平均聚合度≥10)的日粮,试验为期40天。试验结束时,将这批仔猪致死并收集盲肠、近端结肠和远端结肠样品。结果显示,添加两个天然菊粉水平的日粮会增加盲肠和结肠的分子伴侣蛋白、蛋白折叠酶和抗氧化蛋白的表达,它们对维持肠粘膜细胞的完整性以及防止内毒素和活性氧自由基对机体的损伤。总之,本文证实了菊粉对生长猪肠道健康的有益作用。
 
2、试验设计
 
 
3、结果与分析
表1:与对照(C)相比,在饲喂1%菊粉(T1)日粮的猪盲肠中发现差异表达的蛋白质点
 
C和T1日粮组之间总共有16个蛋白质点差异表达,其中13个上调和3个下调点(表1)。第2点和第7点分别标记为MX1和TUBA1B,在T1组中显示了最高表达(分别增加了3.88和4.42倍)。反过来,UDPGDH(第14点)和CKMT1A(第16点)是该组动物中表达最弱的点(分别下降0.45和0.49倍)。
 
表2:与对照(C)相比,在饲喂3%菊粉(T1)日粮的猪盲肠中发现差异表达的蛋白质点
 
日粮中菊粉含量(3%)导致的猪盲肠粘膜的变化更为明显,因为2-DE凝胶分析显示38个差异表达的蛋白质点。其中,与C组相比有18个斑点表达降低,20个表达升高(表2)。组内变异分析表明,C,T1和T2组的CV分别为43.31%,43.63%和40.57%。
 
图1:2D凝胶图像显示在饲喂1%(a)或3%(b)天然菊苣菊粉日粮的成年猪的盲肠中发现差异表达的蛋白质点。点号对应于表1和表2中的点号。
 
 
图2:2D凝胶图像显示在喂食1%(a)或3%(b)天然菊苣菊粉日粮的生长猪近端结肠中检测到的差异表达蛋白质点。点号对应于表3和表4中的点号。
 
 
表3:与对照组(C)相比,添加1%菊粉(T1)的日粮在猪近端结肠中发现差异表达的蛋白质点。
 
相对于C组,在T1组中只有四个蛋白质点发生了显著变化。其中一个被上调,三个被下调,这是对第2号点(0.40,标识为YWHAQ)获得的最低值,(图2a,表3)。
 
表4:与对照组(C)相比,添加了3%菊粉(T2)的日粮在猪近端结肠中发现差异表达的蛋白质点。
 
与对照组相比,T2日粮触发了三个蛋白质点表达的变化,其中两个点被上调,一个点被下调(图2b和表4)。 C,T1和T2组的CV分别为49.82%,51.52%和55.02%。
 
图3:2D凝胶图像显示了在饲喂富含1%(a)或3%(b)天然菊苣菊粉日粮的生长猪远端结肠中检测到的蛋白质点表达变化。 点号对应于表5和表6中的点。
 
 
表5:与对照组(C)组相比,日粮中添加1%菊粉(T1)的猪远端结肠中发现差异表达的蛋白质点
 
与C组相比,T1组日粮显著诱导了22个蛋白质点的表达,并且所有蛋白质点均被上调。如图3a和表5所示,第6号点(VCL)和第18号点(AHCYL1)在T1日粮后显示出最大的蛋白质表达变化(分别增加了3.87和3.00倍)。
 
表6:与对照组(C)相比,日粮中添加3%菊粉(T2)的猪远端结肠中发现了差异表达蛋白质点
 
与C组相比,T2组观察到35个蛋白质点的上调。VCL(第15号斑点)和PSMA5(第34号斑点)的表达也最高,分别增加了3.80倍和3.61倍(图3b和表6)。 C,T1和T2组的CV分别为51.36%,49.40%和46.17%。
 
4. 结论
总之,T2日粮(含3%菊粉)引起蛋白质表达的变化更为明显,特别在生长猪的盲肠和远端结肠粘膜中,其中显示了结构蛋白的显著上调。这些蛋白质中的绝大多数都参与了肌动蛋白丝的重塑以及微管的重组,这可能反映了大肠粘膜的增殖和肠上皮细胞更新率的增加。此外,远端结肠中的新蛋白(一种形成连接复合物的蛋白质)显著上调,有力的支持了益生元可维持肠道上皮屏障功能的观点。此外,分子伴侣,蛋白折叠酶和抗氧化蛋白在盲肠和结肠中表达的增加,共同维持粘膜细胞的完整性并保护其免受内毒素和活性氧的影响,可进一步证实菊粉对肠道健康的积极作用。根据蛋白质组学结果,特别是当日粮添加3%菊粉时,它可以促进生长猪的肠道健康。







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